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    八折超值购:Pull-down实验

    您还在为实验的问题困扰?或在为超出了实验费用犹豫不决?
    辉骏生物为感谢新老客户对我们的支持,特别定制了2019年开学促销,pull down实验八折超值购



    Pull down概念

    在Pull down实验中,带标签的诱饵蛋白能被特异结合该标签的固相亲和配基捕获,形成“次级亲和支持物”,用于纯化与诱饵蛋白相互作用的其他蛋白。纯化产物洗脱后,经Western blot验证或LC-MS/MS,即可证明或鉴定与诱饵蛋白互作的蛋白。


    Pull down实验流程


    辉骏生物: Pull down流程示意图
        图1. Pull down流程示意图



    Pull down实验方案设计


    1、构建含His或GST标签的诱饵蛋白原核表达载体;

    2、原核表达诱饵蛋白(我们采用自诱导培养基培养细菌,能有效降低包涵体的形成);

    3、细菌裂解液过柱,带标签的诱饵蛋白被固相化亲和配基捕获,产生“次级亲和支持物”;

    4、待测样品裂解液过柱孵育,与诱饵蛋白互作的蛋白被“次级亲和支持物”吸附;

    5、清洗,离心,去除未结合的杂蛋白;

    6、洗脱,得到诱饵蛋白及其互作蛋白的复合物;

    7、如要验证某蛋白X与诱饵蛋白互作,则将6.所得的蛋白复合物与X蛋白的抗体孵育,做Western blot验证即可;

    8、如要寻找诱饵蛋白可能的互作蛋白,则需将6.所得的蛋白复合物做LC-MS/MS鉴定。

    图2. Pull down实验流程图



    生物信息学分析

    辉骏生物:GO注释统计
    GO注释统计

     
    Pathway分析Pathway分析
     
                                                       
     
    Pathway分析




    Pull down实验技术服务内容


    1、原核表达载体构建;

    2、融合蛋白的诱导表达与纯化;

    3、pull down捕获互作蛋白;

    4、Western blot验证或LC-MS/MS鉴定互作蛋白;

    5、数据检索、生物信息学分析;

    6、结果分析与报告整理。



    订购Pull down技术服务须知


    为保证pull down实验顺利进行,请告知您的研究背景和目的,并提供目的蛋白对应的mRNA序列或对应基因的NCBI登录号,及拟用的融合标签。
     


    实验周期及费用


    咨询本公司QQ/电话:400 699 1663。


    活动声明


    1、活动时间:2019.02.26—2019.03.26;非活动期间项目不享受相关优惠;
    2、本活动最终解释权归广州辉骏生物科技有限公司所有。


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    电话:400-699-1663 / 020-32053431
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